سلول های بنیادی مزانشیمی با توان تکثیر بالا در محیط رویی کشت اولیه مغز استخوان موش صحرائی

سابقه و هدف: در کشت مغز استخوان به منظورجداسازی سلول های بنیادی مزانشیمی، معمولا سلولهای شناور در محیط کشت اولیه با تعویض محیط، دور ریخته می شود. هدف تحقیق حاضر کشت و تکثیراین سلول ها، بررسی ماهیت بنیادی مزانشیمی آنها، مقایسه سرعت رشد آنها با سلول های چسبنده کشت اولیه و بالاخره بهینه سازی شرایط کشت برای رشد بهتر این سلول هاست.مواد و روشها: در مطالعه تجربی حاضر تعداد 10 سر موش صحرایی نژاد ویستار قربانی شد، مغز استخوان از استخوان درشت نی آنها تهیه و در فلاسک های 75 سانتیمتر مربعی کشت شد. چهار روز پس از آغاز کشت اولیه، محیط رویی جمع آوری و سلول های شناور آن، به موازات سلول های چسبنده تا پاساژ 3 کشت داده شد. در طول مدت کشت، دو گروه از لحاظ زمان دو برابر شدن جمعیت سلولی مقایسه شدند. در پایان، برای دو گروه، بهترین تراکم سلولی و موثرترین غلظت سرم گاوی که بتواند حداکثر تکثیر را در پی داشته باشد، تعیین شد. سلول های جدا شده از لحاظ پتانسیل تمایز به سه رده استخوان، غضروف و چربی ارزیابی شدند.یافته ها: بر اساس نتایج حاصل سلول های محیط رویی، بطور متوسط هر 2±9/14 ساعت دوبرابر شدند، در حالیکه در کشت سلول های چسبنده، این میزان 1/2±19ساعت بود (05/0>p). یافته ها نشان داد که شرایط بهینه برای تکثیر سلولهای بنیادی مزانشیمی با محیط کشت حاوی15% سرم و تراکم اولیه100 سلول در سانتیمتر مربع فراهم می شود. سلولهای جدا شده، براحتی به سه رده اسکلتی متمایز شدند. این قضیه در رنگ آمیزی اختصاصی و rt-pcr برای بیان ژنهای ویژه سه رده کاملا مشهود بود.نتیجه گیری: محیط رویی کشت اولیه مغز استخوان موش صحرایی حاوی سلول های بنیادی مزانشیمی با توان تکثیر بالاست.